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      Tau 和 Alpha突觸核蛋白共聚集體原纖維介紹

      更新時間:2024-03-19   點(diǎn)擊次數(shù):456次

      Tau 和 Alpha突觸核蛋白共聚集體原纖維


      Tau 和 Alpha突觸核蛋白共聚集體原纖維

      SPR-494,重組人Tau-352 (胚

      胎 0N3R) 和 Alpha 突觸核蛋白

      共聚集體原纖維

      • StressMarq的共聚集體原纖維

      是用兩種蛋白的單體共同孵育

      形成的原纖維

      • Tau 和 Asyn蛋白存在于同一條

      纖維上

      Tau-352 (胚胎 0N3R) 和

      Alpha 突觸核蛋白共聚集體

      原纖維(SPR-494)既可以

      聚集Asyn單體也可以聚集

      Asyn和Tau 蛋白單體的混合

      • Tau蛋白單體也可以被聚集,

      但是ThT信號不明顯

      Tau 和 Alpha突觸核蛋白共聚集體原纖維

      SPR-495,重組人Tau-441

      (2N4R) 和 Alpha 突觸核蛋白共

      聚集體原纖維

      • StressMarq的共聚集體原纖維

      是用兩種蛋白的單體共同孵育

      形成的原纖維

      • Tau 和 Asyn蛋白存在于同一條

      纖維上

      Tau-441 (2N4R) 和 Alpha 突

      觸核蛋白共聚集體原纖維

      (SPR-495)既可以聚集

      Asyn單體也可以聚集Asyn和

      Tau 蛋白單體的混合物

      • Tau蛋白單體也可以被聚集,

      但是ThT信號不明顯

      Tau 和 Alpha突觸核蛋白共聚集體原纖維

      Tau & Alpha 突觸核蛋白共聚集體原纖維

      的免疫電鏡圖。6nm 膠體金信號來自α突

      觸核蛋白,12nm 膠體金信號來自tau蛋

      白??煽吹絻煞N信號同時出現(xiàn)在SPR-494

      和SPR-495的單條纖維上。而對照組不會

      同時出現(xiàn)兩種信號。

      實(shí)驗(yàn)方法:原纖維被吸附到碳涂層銅網(wǎng)格上。網(wǎng)格用含1% BSA 和 0.1% Tween-20 的PBS 封閉,洗滌,然后依次在封閉緩沖液中用 20 µg/mL 的一抗孵育,洗滌,再在封閉緩沖液中用 20 µg/mL 的二抗孵育,洗滌并用2% 乙酸雙氧鈾作為負(fù)染色。 6nm(asyn)和 12nm(tau)信號同時出現(xiàn)在共聚集體原纖維樣品的同一原纖維鏈中,并且在對照 α- 突觸核蛋白或 tau 原纖維中未觀察到抗體交叉反應(yīng)。一抗:小鼠抗人asyn單克隆抗體(StressMarq SMC-532)和兔抗人tau多克隆抗體(StressMarq SPC-802);二抗:6nm 膠體金標(biāo)記的山羊抗小鼠抗體 (Jackson ImmunoResearch 115-195-146) 和 12nm膠體金標(biāo)記的山羊抗兔抗體 (Jackson ImmunoResearch 115-195-146)。



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